实验室有一台新的中低通量磁珠提取系统(KingFisher Duo Prime),

KingFisher Duo Prime仪器

基本上没人用过。培训已经是一年前的事情了。前段时间买了一个天根的磁珠法提取RNA的试剂盒(DP761),最近要提培养细胞的RNA,于是拿来试了一下。以前用的是Trizol,氯仿貌似不好买;另外,试剂毒性较大。

 昨天花了一个多小时折腾仪器,程序怎么设好,还是没怎么搞明白。晚上从官网的方案里找了一个程序:A27828_DUO_Tissue_Cells.bdz。按照这个方案,根据天根的说明书改了一下程序。
程序1-1
程序1-2
跑了第一遍,中间出现好几个问题。
 (1) 最开始样品加成了竖排了,看着磁棒套傻眼了;
 (2) 磁珠都没有混匀就往上加了,有一孔磁珠很少(后来发现不是这样的,是因为磁珠拿起来的时候,上面会沾了磁珠,所以管子里面的量就会看着不一样);
 (3) 把sample-lysis加到A孔了,Elution Buffer加到G孔,最后才发现只有A孔是可以加热的。
 (4) 最后溶解RNA到ddH2O中的时候,液体比较少,我加了50 uL,磁珠有残留,不能够完全洗脱出来,可能跟液体太少有关系(最后通过离心取上清的方法将珠子除去)。

太久没做实验了,手生,囧~。
重来一遍,终于是没问题了,纯度和浓度都OK。